年8月4日9点53分，抵达生工楼B座实验室
年8月4日，DNA凝胶回收、PCR扩增、载体连接、大肠杆菌转化、酵母转化
年8月5日，开始上手操作，菌P验证、保菌、提质粒、酶切验证
年8月6日，配制培养基、酵母转化
年8月13日，熊蜂生假丝酵母摇瓶发酵，调节PH值、测OD含量、测残糖值
年8月15日，槐糖脂降解蓝藻预实验
……
年9月5日，今天又是知识满满的一天!
本文结尾有
超大彩蛋
请向下滑动吧
彩蛋预告
Jiangnan_China的实验组成员进入实验室后，第一天听得一脸懵逼，第二天做得手足无措。最开始是根据实验步骤一步一步操作，然而实验步骤看似简单，在操作时却要处处留心、时时在意、小心谨慎，否则，一不小心就会掉进坑里。但所谓成长不就是在犯了一次错误后，将它铭记在心，不要在同一个坑里再次跌倒吗？
随着时间越来越久，我们掉进的坑也就越多（但频率有所下降），慢慢的竟然积攒起经验来了，这次就让我们把这些经历告诉大家，希望大家能够引以为戒。
凝胶电泳
先倒上一块回收胶吧！
（1）倒胶警告：此处有*，请戴手套！（小颖、小橙中*已深）
（2）放平倒胶板（首先记得放上），否则一块倾斜的回收胶会让人无从下手。（泓宇因为倒歪被骂了）
（3）倒胶前要混匀染色剂和缓冲液，一般先加入染色剂，再倒入核酸胶液，悬空倒入，防止核酸胶的瓶口碰到有*的小瓶子。摇匀后，在凝固前赶紧倒入制胶板中。
（4）自己配制核酸胶的时候，一定要把琼脂溶解完全，公用试剂，方便大家！
（5）点样提醒：不要加太满会溢出；用另一只手扶着可以防止手抖哦！
（6）跑胶前要使胶块前端水平，垂直于电泳方向。
DNA凝胶回收
先要把目的条带给切下来。
（1）三字原则：快、准、狠。
（2）刀片要垂直，斜了一刀下去可能就找不到目的条带了……（比如小橙上次......）
（3）在做到都切下来的情况下尽量切的薄一些才能更好地溶解。
溶解、吸附加清洗
（1）在离心的时候一定要配平，一定要配平，一定要配平，重要的事说三次！（最好可以添加成双数，可以两两配平。）
（2）提前将洗脱液放进65℃的烘箱里预热。（可以在步骤里加放烘箱这一步就不会忘了。）
（3）加W2要看看盖子上有没有打√（打√即意味着W2已按照说明书要求进行稀释，若未按说明书要求稀释则不可用），没有的话还要进行稀释才能使用。（听说这是敏敏师姐干的）
（4）空离后放进烘箱是为了挥发残留的乙醇，所以别盖上盖子啦。
（5）加洗脱液的时候尽量都打在膜上，别忘记加完静置一分钟充分溶解DNA片段。
摇瓶发酵
（1）摇瓶要扎紧，还需要多加练习。
（2）培养基灭菌时要先压入纱布，再包上报纸，最后用绳子扎紧。（小颖和泓宇的错误示范请往下！）
（3）使用分光光度计测OD，要提前打开分光光度计预热。
（4）测残糖前菌体要离心，取上清液，稀释后再测。（小橙上次没离心，下次不敢了）
错误示例1号（那么报纸去了哪里流浪呢......)
提质粒
听说提质粒是实验室最简单的操作，但再简单也有需要注意的地方！与凝胶回收相同的点此处不再赘述。
（1）加入BufferS2可以裂解菌体，要温和翻转，防止破坏核酸。
（2）加入BufferS2后液体并未变澄清，则是所取菌体太多，需要重新取适量菌体进行离心。
（3）洗脱液要加60-80μl，凝胶回收DNA片段时只要加25μl，不要混淆了。
其他注意事项
（1）配制培养基时，先溶解，再定容。
（2）固体培养基中加抗生素，用心感受温度，不冷不热的时候才能加。
（3）用移液枪时枪头要插紧，掉进菌液中可能会导致染菌。使用完毕调至最大量程处。
（4）有菌液的瓶子，要将菌液倒进锅里煮一煮，煮上了不要忘记关，实在要忘记，就带个计时器。
（5）实验室公共区域如超净台、称量台使用后要收拾整洁。超净台人走灯灭。
错误示例2号(落寞凄凉的枪头......）
江南iGEMers进入实验室后贡献了无数的骚~操~作~，但一个月以来，我们已经熟悉掌握基本操作，犯错频率大幅下降，这里必须要感谢师兄师姐的悉心指导，特以此记不枉成长。
认真做实验的男人最帅！
读者朋友们若也有类似的成长经历，不妨与我们分享哦，满心期待！
那么又到了结束的时候啦，
这一期有什么特别的吗？
当然！
大彩蛋来啦！
希望你不要笑傻哈哈哈哈哈哈哈哈哈哈哈
文稿
褚婕妤
编辑
褚婕妤
图片与视频来源
sosad组合
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